Centrifugiranje plazme ne utječe na koncentracije trombin-antitrombin i plazmin-antiplazmin kompleksa, ali određuje broj trombocitnih mikročestica
Stepień E, Gruszczyński K, Kapusta P, Kowalik A, Wybrańska I. Plasma centrifugation does not influence thrombin-antithrombin and plasmin–antiplasmin levels but determines platelet microparticles count. Biochem Med 2015;25(2):222-9. (originalni članak)
Uvod: Centrifugiranje je ključni korak za pripremu plazme zbog uklanjanja ostatnih elemenata, osobito trombocita i trombocitnih mikročestica (PMP). Naša radna hipoteza bila je da centrifugiranje kao predanalitički korak može utjecati na neke koagulacijske parametre.
Materijali i metode: U istraživanje su uključeni zdravi mladi muškarci (N=17). Za centrifugiranje su primijenjena dva protokola: (A) prvo centrifugiranje na 2500 x g 15 minuta i (B) na 2500 x g 20 minuta na sobnoj temperaturi s laganim usporavanjem. U protokolu (A), drugo centrifugiranje odvijalo se na 2500 x g 15 min, dok je u protokolu (B) drugo centrifugiranje uključivalo 10-minutno vrćenje na 13000 x g. Koncentracije trombin-antitrombin (TAT) i plazmin-antiplazmin (PAP) kompleksa određene su enzimskim imunosorbentnim testovima. PMP su obilježeni CD41 protutijelom i aneksinom V te analizirani protočnom citometrijom. Prokoagulantna aktivnost je izmjerena pomoću kalibriranog automatiziranog trombograma (engl. Calibrated Automated Thrombogram, CAT) iz nagiba krivulje formiranja trombina (tzv. CAT velocity).
Rezultati: Medijani TAT i PAP koncentracija nisu se razlikovali između dva protokola centrifugiranja. Visoka brzina centrifugiranja smanjila je medijan (interkvartilni raspon) broja PMP u plazmi sa 1291 (841-1975) na 573 (391-1010) PMP/µL (P=0,001), a CAT s 2,01 (1,31-2,88) na 0,97 (0,82-1,73) nM/min (P=0,049). Spearmanova korelacijska analiza pokazala je korelaciju između TAT i PMP u protokolu A (rho=0,52, P<0,050), i između PMP i CAT za protokol A (rho=0,74, P<0,050) i protokol B (rho=0,78, P<0,050).
Zaključak: Protokoli centrifugiranja ne utječu na biljege nastanka plazminogena (PAP) i trombina (TAT), ali utječu na broj PMP i prokoagulantnu aktivnost.
Prijevod: Josipa Kuleš, Veterinarski fakultet, Zagreb
