Učinkovitost mješavine citratnog pufera i fluorida u Terumo epruvetama kao inhibitora in vitro glikolize
Bonetti B, Carta M, Montagnana M, Lo Cascio C, Bonfigli AR, Mosca A, Roberto Testa, on behalf of the Italian joint SIBioC-SIPMeL Study Group on Diabetes Mellitus. Effectiveness of citrate buffer-fluoride mixture in Terumo tubes as an inhibitor of in vitro glycolysis. Biochem Med 2016;26(1):68-76. (originalni članak)
Uvod: Glikoliza utječe na određivanje glukoze in vitro. Preporuke nalažu postavljanje epruveta s uzorkom nakon uzimanja krvi u ledenu vodenu kupelj te odvajanje plazme unutar 30 minuta ili korištenje epruveta s inhibitorima glikolize. Cilj ovog istraživanja u dva stupnja bio je procijeniti koja Terumo epruveta je najbolja za određivanje glukoze u rutinskom radu kliničkog laboratorija.
Materijali i metode: U prvom istraživanju prikupljena je krv 100 dobrovoljaca u epruvete s Li-heparinom (LH), NaF/Na-heparinom (FH) i NaF/citratom/Na2EDTA (FC epruveta). S uzorkom LH postupalo se prema preporuci i smatrao se referentnim uzorkom, dok su uzorci FH i FC epruveta alikvotirani, čuvani na sobnoj temperaturi 1, 2 i 4 sata, centrifugirani, a plazma je analizirana u triplikatu. U drugom istraživanju, uzorci 375 dobrovoljaca prikupljani su u LH, FH i FC epruvete te čuvani na sobnoj temperaturi 10 do 340 minuta prije centrifugiranja, ovisno o praksi u laboratorijima. Uzorci su analizirani u jednom primjerku.
Rezultati: U prvom istraživanju, koncentracija glukoze bila je 5,15±0,66 mmol/L, 5,05±0,65 mmol/L i 5,00±0,65 mmol/L (P<0,001) u FH epruvetama čuvanima na sobnoj temperaturi 1, 2 i 4 sata. Prosječna odstupanja u svim vremenskim točkama nadišla su analitičke ciljeve poželjnog odstupanja temeljenog na kriteriju biološke varijacije. Koncentracija glukoze u FC epruvetama čuvanih na sobnoj temperaturi 1, 2 i 4 sata bila je 5,48±0,65 mmol/L, 5,46±0,6 mmol/L i 5,46±0,64 mmol/L. Prosječna odstupanja za glukozu u FC epruvetama u svim vremenskim točkama dostigla su optimalne analitičke ciljeve. U drugom istraživanju, odstupanja za LH i FH glukozu u usporedbi s referentnom glukozom u FC epruveti nadišla su unaprijed zadane analitičke ciljeve, neovisno o vremenskom intervalu između prikupljanja krvi i centrifugiranja.
Zaključak: Koncentracija glukoze u FC epruvetama bila je sačuvana do 4 sata čuvanja na sobnoj temperaturi. Potvrdili smo da NaF sam ne omogućava trenutnu inhibiciju glikolize u realnim uvjetima čuvanja prije centrifugiranja (do 340 minuta). U laboratorijima koji nisu u mogućnosti primijeniti preporučeno rukovanje uzorcima, za određivanje glukoze treba se koristiti isključivo FC epruvete.
Prijevod: Patricija Banković Radovanović, OB Pula, Pula