ICP-MS kao kandidat za referentnu metodu kvantifikacije klorida u znoju

Jake T. Collie, R. John Massie, Oliver A.H. Jones, Paul D. Morrison i Ronda F. Greeaves. A candidate reference method using ICP-MS for sweat chloride quantification. Clin Chem Lab Med 2016;54(4):561-567. (originalni članak)

Cistična fibroza je najčešća nasljedna bolest koja dovodi do skraćenog životnog vijeka oboljelih. Glavni korak u postavljanju dijagnoze je još uvijek kvantificiranje klorida u znoju zbog nemogućnosti testiranja >1800 mutacija u rutinskoj dijagnostici. Jedan od problema koji se javlja prilikom kvantifikacije klorida u znoju je činjenica da se vrlo često kalibracijske krivulje serumskih klorida ekstrapoliraju kako bi odgovarale koncentracijama klorida u znoju, što indirektno utječe na točnost, jer vrijednosti kalibracijskih točaka seruma ne obuhvaćaju niže koncentracije koje se nalaze u znoju. Masena spektrometrija s induktivno spregnutom plazmom (engl. Inductively Coupled Plasma Mass Spectrometry, ICP-MS), za razliku od standardnih metoda kvantifikacije klorida ima poboljšane analitičke izvedbe: mali volumen uzorka, višestruko mjerenje iz jednog uzorka (povećanje točnosti), primjena internog standarda i vrlo visoka osjetljivost.

Cilj ovog istraživanja bio je verificirati metodu kvantificiranja klorida u znoju pomoću ICP-MS.

Uzorci su analizirani na analizatoru Agilent Tehnologies (Mulgrave, VIC, Australia) 7700x ICP-MS. Kao pomoćni plin i plin nosač korišten je argon. Uzorci su bili podijeljeni u tri grupe: materijal za unutarnju kontrolu kvalitete, materijal za vanjsku kontrolu kvalitete te uzorci znoja dobrovoljnih ispitanika. Postupkom verifikacije ispitani su sljedeći parametri: linearnost, slijepa proba (engl. limit of blank, LOB), granica detekcije (engl. limit of detection, LOD), granica kvantifikacije (engl. limit of quantitation, LOQ), nepreciznost i istinitost (engl. bias). Dozvoljeno odstupanje prema Australazijskom programu osiguranja kvalitete (engl. the Royal College of Pathologist of Australasia Quality Assurance Program, RCPAQAP) iznosilo je ±5% za vrijednosti >40 mmol/L i ±2 mmol/L za vrijednosti ≤40 mmol/L, a dozvoljen koeficijent varijacije <5%.

Ispitivanjem su dobivene sljedeće značajke: linearnost do 225 mmol/L; LOB 1,7 mmol/L; LOD 2,2 mmol/L; LOQ 7,4 mmol/L. Koeficijenti varijacije i odstupanje su iznosili 1,9% i 1,5 mmol/L , odnosno 3,6 %, te 3,8 mmol/L, ovisno o načinu primjene internog standarda.

Rezultati istraživanja su pokazala da je ICP-MS točna, pouzdana i reproducibilna metoda, te da bi trebala postati kandidat za referentnu metodu kvantificiranja klorida u znoju.

Pripremila: Katarina Grdiša, 5. godina studija medicinske biokemije, Farmaceutsko-biokemijski Fakultet